豬乙型腦炎活疫苗(億力能)免疫效果試驗
發(fā)布時間:
2016-02-26 00:00
作者:
王和平
乙型腦炎是由流行性乙型腦炎病毒所引起的一種人畜共患傳染病。豬乙型腦炎主要表現(xiàn)為懷孕母豬流產(chǎn)、死胎、產(chǎn)弱仔,公豬睪丸炎等癥狀。常常給養(yǎng)殖場帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。豬多呈隱性感染,流行有明顯的季節(jié)性,豬感染后的病毒血癥常常成為人類乙腦流行的傳染源。因此,控制豬乙腦流行具有重大意義。中岸生物(原湖南亞華生物藥廠)與人用乙型腦炎活疫苗發(fā)明者中國工程院院士俞永新博士(中國生物制品鑒定所工作)合作,在張道華研究員的主持下,歷時十年,研究成功了豬乙型腦炎弱毒活疫苗 ,于2005年,獲得了豬乙型腦炎活疫苗一類新獸藥證書,證書號:(2005)新獸藥證字32號,同年獲得了第一個豬乙型腦炎活疫苗正式生產(chǎn)批文,從此為中國豬乙型腦炎的防控做出了巨大的貢獻(xiàn)。產(chǎn)品上市以來產(chǎn)量逐年增加,目前該疫苗市場每年供應(yīng)量達(dá)3000萬頭份以上,市場使用率超過60%。
為了全面了解疫苗免疫效果,中岸生物在全國開展了豬乙型腦炎活疫苗(億力能)免疫效果跟蹤試驗。在湖南、湖北、廣東、江西、福建、河南、浙江等省市部分豬場共計約50萬余頭種公母豬進(jìn)行跟蹤試驗。經(jīng)臨床觀察、產(chǎn)仔成績抽樣調(diào)查,結(jié)合抗體檢測、精液檢測、病理剖檢以及病毒分離等,試驗統(tǒng)計結(jié)果表明:豬乙型腦炎活疫苗(億力能)安全有效,具有免疫效果好,保護(hù)率高的特點,是規(guī)?;i場首選疫苗。一材 料
疫苗:億力能 ,豬乙型腦炎活疫苗(SA14-14-2株),湖南中岸生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。
抗體檢測試劑盒:豬乙型腦炎酶聯(lián)免疫(ELISA)診斷試劑盒:深圳市綠詩源生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),主要檢測豬血清中乙型腦炎病毒IgG抗體。
抽樣豬群:湖南、湖北、廣東、江西、福建、河南、浙江等省的大中小型豬場,共計39400頭后備母豬,3500頭后備種公豬。
二方 法
臨床觀察:觀察和記錄豬乙型腦炎活疫苗免疫豬群飲水、采食、精神狀況及體溫變化。免疫種公豬特別注意陰囊外觀、睪丸發(fā)育狀況。免疫母豬注意配種后的妊娠、分娩情況。
抗體檢測:采取部分免疫豬群免疫前和免疫21日后血樣,運用ELISA診斷試劑盒檢測乙腦抗體水平。參照試劑盒說明書操作。產(chǎn)仔成績:將同群6~7月齡后備母豬隨機分組,免疫組分別于配種前30日和配種前7日每頭肌注豬乙腦活疫苗1ml(1頭份),提供精液的公豬須經(jīng)乙腦抗體檢測呈陰性,同時設(shè)立對照組。調(diào)查統(tǒng)計妊娠母豬產(chǎn)活仔總數(shù),計算平均窩產(chǎn)活仔數(shù)及平均活仔率。將免疫組與對照組及往年非免疫初產(chǎn)豬群產(chǎn)仔成績相比較。免疫組、對照組均同條件下管理飼養(yǎng),其它疫苗按該場免疫程序接種。胎兒剖檢及病毒分離:將試驗豬場試驗豬群所產(chǎn)死胎以及出生3日內(nèi)可疑死亡、弱仔抽樣剖檢,取胎兒腦組織制成懸液接種BHK21細(xì)胞進(jìn)行病毒分離確診。炎癥睪丸剖檢及精液檢測 :將同群6~7月齡試驗后備公豬隨機分組,免疫組肌注1ml(1頭劑)豬乙型腦炎活疫苗,間隔3周后加強免疫1次(1ml)。免疫組、對照組公豬觀察睪丸發(fā)育情況,采集精液測定精液品質(zhì)。對發(fā)育異常睪丸剖檢,取睪丸樣、精液樣進(jìn)行病毒分離確診。
三試驗結(jié)果免疫臨床觀察:所有免疫豬群體溫正常,飲食正常,精神狀況良好,無一例后備公豬因接種豬乙型腦炎活疫苗引發(fā)睪丸紅腫、發(fā)熱現(xiàn)象,也無一例免疫母豬因接種豬乙型腦炎活疫苗出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象??贵w檢測 :從實驗豬場共抽取39400份后備母豬和3500份后備公豬血清,運用ELISA診斷試劑盒檢測乙腦抗體水平。免疫前血清陽性有600份,免疫21日后血清陽性有42600份,轉(zhuǎn)陽率達(dá)98%,具體見表1:
產(chǎn)仔成績:從試驗豬場抽樣統(tǒng)計1576頭免疫初產(chǎn)母豬產(chǎn)仔情況:免疫組窩平均活仔為10.42頭,平均活仔率為95.5%,對照組窩平活仔為7.68頭,平均活仔率為70.5%,兩組比較:免疫組比對照組窩平多產(chǎn)活仔2.74頭,活仔率提高25%,經(jīng)統(tǒng)計分析,差異極顯著(P<0.01)(詳見表2)。同時,將免疫組與該場往年非免疫初產(chǎn)豬群相比每窩多產(chǎn)活仔數(shù)1~2頭,平均活仔率提高8~15%,產(chǎn)仔成績顯著提高。
胎兒剖檢及病毒分離 :對初產(chǎn)試驗豬群所產(chǎn)死胎、流產(chǎn)胎(每窩取1例)及出生3日內(nèi)可疑死亡弱仔(如有神經(jīng)癥狀)抽樣剖檢。免疫組取樣17例,剖檢發(fā)現(xiàn)胎兒病例臟器病變各不相同,腦內(nèi)水腫出血現(xiàn)象少,有些出現(xiàn)黃疸現(xiàn)象,取胎兒腦組織制成10%懸液,接種BHK21細(xì)胞,未分離到乙腦病毒。對照組抽取29例剖檢(流產(chǎn)胎每窩取1例),發(fā)現(xiàn)胎兒病例臟器病變大致相同,主要表現(xiàn)血液稀薄,腹水多,腦內(nèi)出血水腫,取胎兒腦組織制成懸液接種BHK21細(xì)胞分離病毒,有27例分離到乙腦病毒,詳情見表3:
炎癥睪丸剖檢及精液檢測 :免疫組52頭后備公豬有2例出現(xiàn)睪丸炎,其中1例經(jīng)抗菌藥物治療后康復(fù),2例均淘汰后,取睪丸制成懸液,接種BHK21細(xì)胞未分離到乙腦病毒;而對照組13頭后備公豬有3例出現(xiàn)睪丸炎。3例淘汰后摘取睪丸制成懸液,接種BHK21細(xì)胞培養(yǎng),有2例分離到乙腦病毒(詳見表4)。免疫組和對照組實驗公豬在初配前采集精液,進(jìn)行精子密度、精子活率項目的品質(zhì)評定,對異常精液進(jìn)行乙腦病毒分離,結(jié)果免疫組未分離到乙腦病毒,對照組又有1例分離到乙腦病毒(詳見表4、表5)。
注:精子密度:用血球計數(shù)計算精子數(shù),大于2億/ml為密,1~2億/ml為中,小于1億/ml為稀。
精子活率:用前進(jìn)運動精子數(shù)占精子總數(shù)的百分率表示,超過60%為正常,反之為異常。
四討論與結(jié)論根據(jù)對本次實驗豬場39400頭免疫后備母豬和3500頭免疫后備公豬的臨床觀察及其它用苗單位信息反饋,無一例因免疫接種所致異常反應(yīng)。免疫豬群亦無一例因感染乙腦病毒引起流產(chǎn)和睪丸炎。結(jié)果表明:中岸生物生產(chǎn)的豬乙型腦炎活疫苗(SA14-14-2株)(億力能)接種豬群后不會誘發(fā)懷孕母豬流產(chǎn)、死胎及公豬睪丸炎,對免疫豬群具有可靠的安全性。乙腦強毒感染懷孕母豬能夠侵襲胎盤感染子宮內(nèi)胎兒,引起母豬流產(chǎn)、死胎;感染種公豬引起公豬睪丸炎;本次試驗免疫后備母豬和后備種公豬被乙型腦炎強毒感染病例明顯低于非免疫對照。結(jié)果表明:繁殖豬群接種豬乙型腦炎活疫苗(億力能)能夠有效地產(chǎn)生免疫力,抵御乙腦強毒感染,降低妊娠豬流產(chǎn)、死胎及預(yù)防公豬睪丸炎,具有較好的免疫效果。
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