乙型腦炎是由流行性乙型腦炎病毒所引起的一種人畜共患傳染病。豬乙型腦炎主要表現(xiàn)為懷孕母豬流產(chǎn)、死胎、產(chǎn)弱仔，公豬睪丸炎等癥狀。常常給養(yǎng)殖場帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。豬多呈隱性感染，流行有明顯的季節(jié)性，豬感染后的病毒血癥常常成為人類乙腦流行的傳染源。因此，控制豬乙腦流行具有重大意義。中岸生物（原湖南亞華生物藥廠）與人用乙型腦炎活疫苗發(fā)明者中國工程院院士俞永新博士（中國生物制品鑒定所工作）合作，在張道華研究員的主持下，歷時(shí)十年，研究成功了豬乙型腦炎弱毒活疫苗 ，于2005年，獲得了豬乙型腦炎活疫苗一類新獸藥證書，證書號：（2005）新獸藥證字32號，同年獲得了第一個(gè)豬乙型腦炎活疫苗正式生產(chǎn)批文，從此為中國豬乙型腦炎的防控做出了巨大的貢獻(xiàn)。產(chǎn)品上市以來產(chǎn)量逐年增加，目前該疫苗市場每年供應(yīng)量達(dá)3000萬頭份以上，市場使用率超過60%。

一、材 料

一、材 料

  疫苗：億力能 ，豬乙型腦炎活疫苗（SA14-14-2株），湖南中岸生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。

  抗體檢測試劑盒：豬乙型腦炎酶聯(lián)免疫(ELISA)診斷試劑盒：深圳市綠詩源生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，主要檢測豬血清中乙型腦炎病毒IgG抗體。

  抽樣豬群：湖南、湖北、廣東、江西、福建、河南、浙江等省的大中小型豬場，共計(jì)39400頭后備母豬，3500頭后備種公豬。

二、方 法

   臨床觀察：觀察和記錄豬乙型腦炎活疫苗免疫豬群飲水、采食、精神狀況及體溫變化。免疫種公豬特別注意陰囊外觀、睪丸發(fā)育狀況。免疫母豬注意配種后的妊娠、分娩情況。

   抗體檢測：采取部分免疫豬群免疫前和免疫21日后血樣，運(yùn)用ELISA診斷試劑盒檢測乙腦抗體水平。參照試劑盒說明書操作。產(chǎn)仔成績：將同群6～7月齡后備母豬隨機(jī)分組，免疫組分別于配種前30日和配種前7日每頭肌注豬乙腦活疫苗1ml（1頭份），提供精液的公豬須經(jīng)乙腦抗體檢測呈陰性，同時(shí)設(shè)立對照組。調(diào)查統(tǒng)計(jì)妊娠母豬產(chǎn)活仔總數(shù)，計(jì)算平均窩產(chǎn)活仔數(shù)及平均活仔率。將免疫組與對照組及往年非免疫初產(chǎn)豬群產(chǎn)仔成績相比較。免疫組、對照組均同條件下管理飼養(yǎng)，其它疫苗按該場免疫程序接種。胎兒剖檢及病毒分離：將試驗(yàn)豬場試驗(yàn)豬群所產(chǎn)死胎以及出生3日內(nèi)可疑死亡、弱仔抽樣剖檢，取胎兒腦組織制成懸液接種BHK21細(xì)胞進(jìn)行病毒分離確診。炎癥睪丸剖檢及精液檢測 ：將同群6～7月齡試驗(yàn)后備公豬隨機(jī)分組，免疫組肌注1ml（1頭劑）豬乙型腦炎活疫苗，間隔3周后加強(qiáng)免疫1次（1ml）。免疫組、對照組公豬觀察睪丸發(fā)育情況，采集精液測定精液品質(zhì)。對發(fā)育異常睪丸剖檢，取睪丸樣、精液樣進(jìn)行病毒分離確診。

三、試驗(yàn)結(jié)果免疫臨床觀察

   所有免疫豬群體溫正常，飲食正常，精神狀況良好，無一例后備公豬因接種豬乙型腦炎活疫苗引發(fā)睪丸紅腫、發(fā)熱現(xiàn)象，也無一例免疫母豬因接種豬乙型腦炎活疫苗出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象。抗體檢測 ：從實(shí)驗(yàn)豬場共抽取39400份后備母豬和3500份后備公豬血清，運(yùn)用ELISA診斷試劑盒檢測乙腦抗體水平。免疫前血清陽性有600份，免疫21日后血清陽性有42600份，轉(zhuǎn)陽率達(dá)98%，具體見表1：

   產(chǎn)仔成績：從試驗(yàn)豬場抽樣統(tǒng)計(jì)1576頭免疫初產(chǎn)母豬產(chǎn)仔情況：免疫組窩平均活仔為10.42頭，平均活仔率為95.5%，對照組窩平活仔為7.68頭，平均活仔率為70.5%，兩組比較：免疫組比對照組窩平多產(chǎn)活仔2.74頭，活仔率提高25%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，差異極顯著（P<0.01）（詳見表2）。同時(shí)，將免疫組與該場往年非免疫初產(chǎn)豬群相比每窩多產(chǎn)活仔數(shù)1～2頭，平均活仔率提高8～15%，產(chǎn)仔成績顯著提高。

   胎兒剖檢及病毒分離 ：對初產(chǎn)試驗(yàn)豬群所產(chǎn)死胎、流產(chǎn)胎（每窩取1例）及出生3日內(nèi)可疑死亡弱仔（如有神經(jīng)癥狀）抽樣剖檢。免疫組取樣17例，剖檢發(fā)現(xiàn)胎兒病例臟器病變各不相同，腦內(nèi)水腫出血現(xiàn)象少，有些出現(xiàn)黃疸現(xiàn)象，取胎兒腦組織制成10%懸液，接種BHK21細(xì)胞，未分離到乙腦病毒。對照組抽取29例剖檢（流產(chǎn)胎每窩取1例），發(fā)現(xiàn)胎兒病例臟器病變大致相同，主要表現(xiàn)血液稀薄，腹水多，腦內(nèi)出血水腫，取胎兒腦組織制成懸液接種BHK21細(xì)胞分離病毒，有27例分離到乙腦病毒，詳情見表3：

   炎癥睪丸剖檢及精液檢測 ：免疫組52頭后備公豬有2例出現(xiàn)睪丸炎，其中1例經(jīng)抗菌藥物治療后康復(fù)，2例均淘汰后，取睪丸制成懸液，接種BHK21細(xì)胞未分離到乙腦病毒；而對照組13頭后備公豬有3例出現(xiàn)睪丸炎。3例淘汰后摘取睪丸制成懸液，接種BHK21細(xì)胞培養(yǎng)，有2例分離到乙腦病毒（詳見表4）。免疫組和對照組實(shí)驗(yàn)公豬在初配前采集精液，進(jìn)行精子密度、精子活率項(xiàng)目的品質(zhì)評定，對異常精液進(jìn)行乙腦病毒分離，結(jié)果免疫組未分離到乙腦病毒，對照組又有1例分離到乙腦病毒（詳見表4、表5）。

   注：精子密度：用血球計(jì)數(shù)計(jì)算精子數(shù)，大于2億/ml為密，1～2億/ml為中，小于1億/ml為稀。

精子活率：用前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)占精子總數(shù)的百分率表示，超過60%為正常，反之為異常。

四、討論與結(jié)論：

   根據(jù)對本次實(shí)驗(yàn)豬場39400頭免疫后備母豬和3500頭免疫后備公豬的臨床觀察及其它用苗單位信息反饋，無一例因免疫接種所致異常反應(yīng)。免疫豬群亦無一例因感染乙腦病毒引起流產(chǎn)和睪丸炎。結(jié)果表明：中岸生物生產(chǎn)的豬乙型腦炎活疫苗（SA14-14-2株）（億力能）接種豬群后不會(huì)誘發(fā)懷孕母豬流產(chǎn)、死胎及公豬睪丸炎，對免疫豬群具有可靠的安全性。乙腦強(qiáng)毒感染懷孕母豬能夠侵襲胎盤感染子宮內(nèi)胎兒，引起母豬流產(chǎn)、死胎；感染種公豬引起公豬睪丸炎；本次試驗(yàn)免疫后備母豬和后備種公豬被乙型腦炎強(qiáng)毒感染病例明顯低于非免疫對照。結(jié)果表明：繁殖豬群接種豬乙型腦炎活疫苗（億力能）能夠有效地產(chǎn)生免疫力，抵御乙腦強(qiáng)毒感染，降低妊娠豬流產(chǎn)、死胎及預(yù)防公豬睪丸炎，具有較好的免疫效果。

億力能簡介：

   1、院士合作：中岸生物（原湖南亞華生物藥廠）與人用乙型腦炎活疫苗發(fā)明者中國工程院院士俞永新博士（中國生物制品鑒定所工作）合作，在張道華研究員的主持下，研究成功了豬乙型腦炎弱毒活疫苗； 
  2、歷時(shí)十年：歷時(shí)10年成功研發(fā)了豬用乙型腦炎弱毒活疫苗(SA14-14-2株)---億力能；
  3、國家一類新獸藥：2005年獲得了國家一類新獸藥證書（證書號：（2005）新獸藥生字32號），填補(bǔ)了國內(nèi)外空白；
  4、由企業(yè)制定的國家乙腦疫苗相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)：中岸生物制定了豬乙型腦炎活疫苗國家標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)規(guī)程，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)已收錄到《中華人民共和國獸藥典第三部》。

億力能特點(diǎn)：

    1、具有廣譜的抗原性和免疫原性：疫苗免疫后抗體產(chǎn)生快，維持時(shí)間長，有效保護(hù)率高達(dá)98%以上。
  2、超高安全性：對小鼠和幼恒河猴的腦內(nèi)毒力為零，對豬無神經(jīng)毒力。大劑量免疫不會(huì)造成懷孕母豬流產(chǎn)，不會(huì)引起公豬睪丸炎。該疫苗毒株生物學(xué)特性穩(wěn)定，在乳豬腦內(nèi)連續(xù)傳5代，無毒力返強(qiáng)及基因變異現(xiàn)象。
   3、以人用乙腦疫苗為標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)：采用SPF金黃地鼠腎原代細(xì)胞生產(chǎn)（人用乙腦疫苗的原材料），質(zhì)量穩(wěn)定、純凈高效。覆蓋了全國30多個(gè)省市的數(shù)萬家規(guī)?；i場，市場使用率超過60%，為規(guī)模化豬場首選疫苗。
    4、抗原含量高（國標(biāo)的5-10倍）：免疫效果好。
    5、乙腦專用稀釋液：含有獨(dú)特的免疫增強(qiáng)劑“胞肽”，胞肽是專利產(chǎn)品，具有免疫增強(qiáng)作用，臨床使用提升免疫效果。
    6、有效提高公豬對乙腦的抵抗力，減少睪丸炎，提高公豬精子活力和精子密度，提高生產(chǎn)性能，延長公豬使用年限。

   總結(jié)：在俞永新院士和張道華研究員的通力合作下，湖南中岸生物（原湖南亞華）在國際上首次成功研發(fā)出了豬乙型腦炎弱毒活疫苗(SA14-14-2株)---億力能，為豬乙型腦炎的防控做出了巨大的貢獻(xiàn)。